出願番号 : 特許出願平8-348898 出願日 : 1996年12月26日
公開番号 : 特許公開平10-179148 公開日 : 1998年7月7日
出願人 : 科学技術振興事業団 発明者 : 立野 知世 外2名
【課題】 肝前駆細胞を含むと考えられるコロニー形成能を有するヒト小型肝細胞を効率よく取得し、培養するための方法を提供する。
【解決手段】 ヒトの肝臓から分取した正常肝細胞をコラゲナーゼおよびディスパーゼの混合溶液で処理したのち、分散させた肝細胞を低速遠心して重量画分と計量画分とに分離し、軽量画分中の小型肝細胞を採取してヒト小型肝細胞を取得し、この肝細胞を低速遠心して重量画分と軽量画分とに分離し、軽量画分中の小型肝細胞をヒト血清およびアスコルビン酸類を必須として含有する培地と3T3細胞のコンディションドメディウムとの混合培地で初代培養してコロニーを形成させてクローン性増殖能を有するヒト小型肝細胞を取得し、次いで、EDTA/トリプシン溶液によって培地から剥がしたコロニーの小型肝細胞を、上記混合培地で再度培養することによってコロニーを形成させる。 明細書Text >> J-tokkyo
公開番号 : 特許公開平10-179148 公開日 : 1998年7月7日
出願人 : 科学技術振興事業団 発明者 : 立野 知世 外2名
【課題】 肝前駆細胞を含むと考えられるコロニー形成能を有するヒト小型肝細胞を効率よく取得し、培養するための方法を提供する。
【解決手段】 ヒトの肝臓から分取した正常肝細胞をコラゲナーゼおよびディスパーゼの混合溶液で処理したのち、分散させた肝細胞を低速遠心して重量画分と計量画分とに分離し、軽量画分中の小型肝細胞を採取してヒト小型肝細胞を取得し、この肝細胞を低速遠心して重量画分と軽量画分とに分離し、軽量画分中の小型肝細胞をヒト血清およびアスコルビン酸類を必須として含有する培地と3T3細胞のコンディションドメディウムとの混合培地で初代培養してコロニーを形成させてクローン性増殖能を有するヒト小型肝細胞を取得し、次いで、EDTA/トリプシン溶液によって培地から剥がしたコロニーの小型肝細胞を、上記混合培地で再度培養することによってコロニーを形成させる。 明細書Text >> J-tokkyo