特殊な酵素や配列を必要としない汎用性ある染色体改変方法

国際出願番号 : ＰＣＴ／ＪＰ２００６／３２３８５２ 国際出願日 : ２００６年１１月２９日
国際公開番号 : ＷＯ２００７／０６３９１９ 国際公開日 : ２００７年６月７日
出願人 : 旭硝子株式会社 発明者 : 平島 匡太郎 外２名

発明の名称 : 染色体改変方法

特殊な酵素や配列を必要としない汎用性ある染色体改変方法、及び細胞の増殖に必須の遺伝子を判定する方法を提供する。
まず、ネガティブセレクションできる選択マーカー遺伝子（Ｂ）を標的ＤＮＡ領域（Ｘ）の上流または下流に組み込み、かつこの選択マーカー遺伝子（Ｂ）と標的ＤＮＡ領域（Ｘ）とを重複配列で挟む。より好ましくは、配列（Ａ’）［標的ＤＮＡ領域の下流に存在する特定配列（Ａ）と実質的に同一の配列］と上記選択マーカー遺伝子（Ｂ）とを有するＤＮＡ断片を作成し、そのＤＮＡ断片を標的ＤＮＡ領域（Ｘ）の上流に組み込む。次いで相同組換えとネガティヴセレクションを行うことにより、容易に上記標的ＤＮＡ領域（Ｘ）を染色体中から除去できる。また、上記作用後に標的ＤＮＡ領域（Ｘ）が染色体中に存在しない場合は、その培養条件下で細胞増殖に必須な遺伝子が標的ＤＮＡ領域（Ｘ）中に含まれないと判定できる。明細書pdf >> かんたん特許検索