ＤＮＡポリメラーゼの定量方法およびそれに有用な試験キット

出願番号 : 特許出願平３－２１６７０３ 出願日 : １９９１年２月２０日
公開番号 : 特許公開平６－６２８９８ 公開日 : １９９４年３月８日
出願人 : イーストマン コダック カンパニー 外１名 発明者 : ジョン ウイリアム エイチ．スザーランド 外２名

【目的】 水性被検体中のＤＮＡポリメラーゼの定量方法を提供する。
【構成】 ＤＮＡポリメラーゼの定量方法であって、その酵素を含有することが疑われる水性被検体を、少なくとも１０－８モル濃度塩基で存在する一本鎖ＤＮＡ鋳型、その鋳型に相補的なＤＮＡプライマー、金属ポリメラーゼ補因子源、そのポリメラーゼの存在下で二本鎖ＤＮＡを合成するのに十分量のデオキシリボヌクレオシドミリン酸、およびポリメラーゼによって、プライム化された一本鎖核酸が二本鎖ＤＮＡに転化されるとき検出可能なシグナルを提供しうる比色または蛍光色素と接触させる工程を含んでなる方法を提供する。次に、シグナルの発生速度を測定し、それをグラフ的または数学的手段によって被検体中のＤＮＡポリメラーゼレベルと相関付けることができる。この方法の結果は、精確であり、共変値が約１０％未満である。この方法を実施するのに必要な試薬類を含む試験キットも提供する。