出願番号 : 特許出願２０００－３７３２５９ 出願日 : ２０００年１２月７日
公開番号 : 特許公開２００２－１７４６３５ 公開日 : ２００２年６月２１日
出願人 : 科学技術振興事業団 外１名 発明者 : 金子 清俊
発明の名称 : 高効率抗体スクリーニング方法
【課題】 顕微鏡下においてのみ認められる微細構造物等を構成する未知の超微量成分を決定することを可能にする、生命活動のある瞬間に特定の組織に存在する標的タンパク質に対する特異抗体を、直接的に高効率でスクリーニングする高効率抗体スクリーニング方法を提供すること。
【解決手段】 タンパク質群を含む生体組織切片等の試料を、必要に応じて抗原の賦活化処理を施した後、パラフィン等の包埋材により包埋処理し、次いでレーザーにより微細穿孔処理を施し標的タンパク質を含む微細構成物部分を露出させ、あるいは前記微細構成物部分の周囲を除去して孤立させた後、ファージ抗体ライブラリーを反応させ、標的タンパク質に結合した抗体を複製し、該複製した抗体を前記標的タンパク質と反応させる操作を１又は２回以上行うパニング操作を行い、生体組織に発現している特定のタンパク質に対する抗体を高効率でスクリーニングする。
出願番号 : 特許出願２０００－３５８５３９ 出願日 : ２０００年１１月２４日
公開番号 : 特許公開２００２－１６２３９８ 公開日 : ２００２年６月７日
出願人 : 科学技術振興事業団 外１名 発明者 : 金子 清俊
発明の名称 : 高効率抗体スクリーニング法
【課題】 試料中の標的タンパク質に対する抗体を高効率でスクリーニングする方法を提供すること。
【解決手段】 タンパク質群を含む試料を二次元電気泳動処理し、前記タンパク質群を二次元電気泳動ゲル上に各スポットタンパク質として展開させ、展開させたスポットタンパク質を固相上に転写した後可視化し、次いで、個々のスポットタンパク質を単離した後、ファージ抗体ライブラリーとを反応させ、スポットタンパク質に結合した抗体を複製し、該複製した抗体を前記スポットタンパク質と反応させる操作を１又は２回以上行い、タンパク質群を含む試料中の特定のタンパク質に対する抗体をスクリーニングする。タンパク質群を含む試料として、細胞亜分画をあらかじめ分離精製した試料や翻訳後修飾を除去した試料を用いることが好ましい。
公開番号 : 特許公開２００２－１７４６３５ 公開日 : ２００２年６月２１日
出願人 : 科学技術振興事業団 外１名 発明者 : 金子 清俊
発明の名称 : 高効率抗体スクリーニング方法
【課題】 顕微鏡下においてのみ認められる微細構造物等を構成する未知の超微量成分を決定することを可能にする、生命活動のある瞬間に特定の組織に存在する標的タンパク質に対する特異抗体を、直接的に高効率でスクリーニングする高効率抗体スクリーニング方法を提供すること。
【解決手段】 タンパク質群を含む生体組織切片等の試料を、必要に応じて抗原の賦活化処理を施した後、パラフィン等の包埋材により包埋処理し、次いでレーザーにより微細穿孔処理を施し標的タンパク質を含む微細構成物部分を露出させ、あるいは前記微細構成物部分の周囲を除去して孤立させた後、ファージ抗体ライブラリーを反応させ、標的タンパク質に結合した抗体を複製し、該複製した抗体を前記標的タンパク質と反応させる操作を１又は２回以上行うパニング操作を行い、生体組織に発現している特定のタンパク質に対する抗体を高効率でスクリーニングする。
出願番号 : 特許出願２０００－３５８５３９ 出願日 : ２０００年１１月２４日
公開番号 : 特許公開２００２－１６２３９８ 公開日 : ２００２年６月７日
出願人 : 科学技術振興事業団 外１名 発明者 : 金子 清俊
発明の名称 : 高効率抗体スクリーニング法
【課題】 試料中の標的タンパク質に対する抗体を高効率でスクリーニングする方法を提供すること。
【解決手段】 タンパク質群を含む試料を二次元電気泳動処理し、前記タンパク質群を二次元電気泳動ゲル上に各スポットタンパク質として展開させ、展開させたスポットタンパク質を固相上に転写した後可視化し、次いで、個々のスポットタンパク質を単離した後、ファージ抗体ライブラリーとを反応させ、スポットタンパク質に結合した抗体を複製し、該複製した抗体を前記スポットタンパク質と反応させる操作を１又は２回以上行い、タンパク質群を含む試料中の特定のタンパク質に対する抗体をスクリーニングする。タンパク質群を含む試料として、細胞亜分画をあらかじめ分離精製した試料や翻訳後修飾を除去した試料を用いることが好ましい。
