ファフィア株（アスタキサンチン生成）を形質転換する改良法

出願番号 : 特許出願平９－５２３３４０ 出願日 : １９９６年１２月２３日
公表番号 : 特許公表２０００－５０７０８７ 公表日 : ２０００年６月１３日
出願人 : ギスト ブロカデス ベスローテン ファンノートシャップ 外１名 発明者 : フェルドゥース ヤン コルネリス 外１名

発明の名称 : ファフィア株を形質転換する改良法、そのようにして得られた形質転換したファフィア株及び前記方法における組換えＤＮＡ

本発明は、転写プロモーター及び発現すべき下流配列を作用可能な結合で含む組換えＤＮＡであって、該転写プロモーターが高度に発現したファフィア遺伝子、好ましくは解糖系遺伝子、更に好ましくはグリセルアルデヒド－３－リン酸デヒドロゲナーゼをコードする遺伝子のオープンリーディングフレームの上流に見られる領域を含む、前記組換えＤＮＡを提供する。本発明の組換えＤＮＡは、好ましくは、リボソームタンパク質コード化遺伝子のプロモーターを含み、更に好ましくは、該転写プロモーターが配列番号24～50のいずれか１つに記載されるアミノ酸配列の１つで表されるタンパク質をコード化するオープンリーディングフレームの上流に見られる領域を含む。本発明の態様によれば、ファフィア・ロドザイマのカロテノイド生合成経路に関与する酵素をコードする単離したＤＮＡ配列、好ましくは、前記酵素がイソペンテニルピロリン酸イソメラーゼ活性、ゲラニルゲラニルピロリン酸シンターゼ活性、フィトエンシンターゼ活性、フィトエンデサチュラーゼ活性及びリコペンシクラーゼ活性より選ばれた活性をもつ単離したＤＮＡ配列、更に好ましくは配列番号13、配列番号15、配列番号17、配列番号19、配列番号21又は配列番号23で表される配列より選ばれたアミノ酸配列を有する酵素をコードする単離したＤＮＡ配列が提供される。実施態様は、ベクター、形質転換したホスト生物、タンパク質及び／又はアスタキサンチンのようなカロテノイドの作成方法、及びファフィアから高度に発現したプロモーターを単離する方法に関する。