ヒト血清培地を用いるヒト骨髄由来間葉系幹細胞培養法

出願番号 : 特許出願２００４－２４１７４１ 出願日 : ２００４年８月２３日
公開番号 : 特許公開２００６－５５１０６ 公開日 : ２００６年３月２日
出願人 : 独立行政法人産業技術総合研究所 発明者 : 大串 始 外２名

発明の名称 : ヒト血清培地を用いるヒト骨髄由来間葉系幹細胞培養法

【課題】ヒトに移植するための間葉系幹細胞を、ヒト骨髄液から安全且つ効率的に培養する方法を提供する。
【解決手段】ヒト骨髄液を採取し、骨髄由来の間葉系幹細胞を培養して、ヒトに移植するためのヒト間葉系幹細胞を調製する方法であって、以下の工程を含むことを特徴とする方法：
(i) 採取した骨髄液の分量に対して、濃度５～１５Ｕ／ｍＬ程度のヘパリン／緩衝液を
８０～１２０％ｖ／ｖ添加する工程、
(ii) 工程(i)で得られたヘパリン／緩衝液を添加した骨髄液を、ヒト血清を１０～２０
％ｖ／ｖ含むα-MEM培地で培養し、該培養中に少なくとも２回培地交換することにより培養液中に浮遊する血球成分を取り除く工程、および
(iii) 細胞解離剤を用いて間葉系幹細胞を主とする細胞群を培養容器から選択的に剥離
し、剥離された細胞群から間葉系幹細胞以外の接着細胞を分離し、別の容器で選択的に間葉系幹細胞を培養する工程。